Pipet adalah peralatan makmal yang digunakan untuk mengukur dan memindahkan isi padu cecair yang sangat kecil. Ketepatan dalam pengukuran pipet sangat penting kerana perbezaan isipadu yang dijatuhkan oleh pipet dapat mempengaruhi hasil eksperimen. Untuk memastikan ketepatan, penting untuk memeriksa kalibrasi pipet setiap beberapa bulan. Proses penentukuran berguna untuk memeriksa sama ada peralatan ini meneteskan cecair dalam isipadu yang betul, sehingga pembaikan dapat dilakukan jika diperlukan.
Langkah
Bahagian 1 dari 2: Memeriksa Penentukuran
Langkah 1. Kumpulkan bahan yang diperlukan
Untuk memeriksa kalibrasi pipet, yang diperlukan adalah pipet, tip pipet, air suling, bikar, termometer, keseimbangan, dan timbangan. Imbangan yang digunakan mestilah dalam skala mikrogram untuk menentukurkan mikropipet dengan nilai maksimum 1 L.
- Anda tidak memerlukan lebih daripada 5 mL air. Isi bikar dengan air.
- Pastikan hujung pipet betul dan sesuai dengan pipet.
Langkah 2. Ukur suhu air suling
Masukkan termometer ke dalam air dan biarkan selama sekurang-kurangnya satu minit. Sekiranya garis merah termometer masih bergerak, tunggu sebentar. Selepas satu minit, catat suhu. Ambil termometer dan keringkan apabila anda selesai.
Suhu air penting untuk diketahui, kerana ia akan digunakan untuk pengiraan yang dilakukan untuk memeriksa penentukuran
Langkah 3. Letakkan cawan penimbang pada baki dan sifar baki
Sebaik-baiknya, keseimbangan yang digunakan mempunyai pintu dan ruang terlindung di dalamnya. Letakkan cawan penimbang ke dalam ruang keseimbangan dan tutup pintu. Sekiranya baki anda tidak mempunyai bilik dan pintu, letakkan cawan penimbang pada baki. Tekan butang "Zero" atau "Tare" dan tunggu sehingga skala menunjukkan sifar.
Menambah skala mengurangkan berat cawan plastik dan membolehkan anda menimbang hanya berat bahan yang diletakkan di dalam cawan
Langkah 4. Sediakan pipet untuk penentukuran
Lap pipet dengan etanol sebelum memulakan dan pastikan tidak ada yang menyumbat hujung pipet. Pasang hujung pipet yang betul ke hujung pipet dan tentukan isipadu yang akan diuji.
Untuk penentukuran, uji kelantangan terkecil dan terbesar yang dapat dikeluarkan dari pipet
Langkah 5. Basuh hujung pipet sebelum menentukurkannya
Tekan butang ke had pertama dan celupkan hujung pipet ke dalam air suling hingga kedalaman kira-kira 2 mm. Lepaskan butang untuk menyerap sebahagian cecair dan kemudian lepaskan cecair dengan menekan butang. Ulangi langkah ini tiga kali untuk mencuci petua penitis sebelum digunakan.
Tekan butang ke had kedua untuk mengeluarkan sisa cecair di hujung pipet, kemudian keluarkan pipet dari air
Langkah 6. Menghisap isipadu penentukuran
Dengan hujung pipet diletakkan di luar air suling, tekan butang hingga had pertama. Celupkan hujung pipet 2 mm ke dalam air suling dan lepaskan butang untuk menyedut cecair ke hujung pipet. Tunggu sekitar 1 saat sebelum mengeluarkan hujung penitis dari air.
Pastikan hujung pipet terendam sepenuhnya semasa proses aspirasi. Tidak boleh ada gelembung di hujung penitis atau hasilnya mungkin salah
Langkah 7. Tuangkan cecair ke dalam pinggan penimbang di atas baki
Letakkan hujung pipet di bahagian bawah cawan penimbang dan kemudian tekan butang pipet ke had pertama. Pindah ke titik lain, sedikit dari air, kemudian tekan butang ke had kedua. Dengan menekan butang, angkat hujung pipet dari cawan penimbang.
Simpan hujungnya pada pipet kerana anda akan menggunakannya lagi untuk beberapa ujian penentukuran yang lain
Langkah 8. Catat berat yang ditunjukkan pada baki
Tutup pintu gerai keseimbangan jika anda menggunakan baki pintu. Tunggu sehingga nombor tidak berubah lagi. Tulis di buku nota anda.
Penting untuk menunggu sehingga angka pada skala tidak berubah lagi sebelum menuliskannya. Nota akan menjadi salah sekiranya anda tidak menunggu
Langkah 9. Ulangi proses ini untuk melakukan pembacaan sekurang-kurangnya 10 kali
Sifar skala lagi, basuh hujung pipet sebelum digunakan, hisap isi cecair yang sama, keluarkan isipadu, kemudian catat beratnya. Catat berat air suling untuk isipadu yang sama, kemudian rata-rata semua nota anda.
Anda boleh mengulangi proses ini untuk jumlah yang berbeza jika setiap jilid diuji berkali-kali
Bahagian 2 dari 2: Mengira Hasil Penentukuran
Langkah 1. Tentukan formula untuk isipadu yang dikira
Rumus untuk mengira isipadu cecair yang dikeluarkan oleh pipet adalah V = w * Z, w adalah berat air, Z adalah faktor penukaran berdasarkan kepadatan air, sementara V adalah isipadu jumlah air dikeluarkan.
- Pemboleh ubah Z dapat diperoleh dengan mengira ketumpatan air menggunakan suhu yang dicatatkan pada awal eksperimen.
- Contohnya: Sekiranya suhu air 23 ° C, nilai Z adalah 1.0035 g / mg.
Langkah 2. Hitung purata keseluruhan penentukuran pipet
Isi padu air yang dikeluarkan oleh pipet telah ditimbang sekurang-kurangnya sepuluh kali. Untuk menjumlahkan semua nilai ini, tambahkan semuanya bersama-sama dan bahagikan dengan 10. Sekiranya anda melakukan lebih kurang proses, tambah hasil keseluruhan dan kemudian bahagikan dengan jumlah percubaan yang dilakukan.
- Contohnya: Berat air dari 10 eksperimen yang anda lakukan dengan pipet 10µL adalah seperti berikut: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99, dan 9, 98.
- Maksudnya adalah: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
Langkah 3. Pasangkan pemboleh ubah ke dalam persamaan dan selesaikan
Setelah anda menentukan nombor yang betul untuk setiap pemboleh ubah, masukkan ke dalam formula dan lengkapkan isipadu yang dikira. Untuk menyelesaikan persamaan ini, gandakan berat purata semua ujian dengan nilai Z.
Contohnya: V = w * Z = 9,984 * 1,0035 = 10, 019
Langkah 4. Hitung ketepatan pipet
Gunakan persamaan A = 100 x Vpurata/ V0 untuk mengira ketepatan pipet. A menunjukkan ketepatan pipet, Vpurata ialah isipadu min yang dikira, dan V0 adalah nilai yang ditetapkan pada pipet. Nilai ketepatan hendaklah antara 99-101%.
- Sekiranya pipet dikalibrasi dengan betul, nilai yang dikira mestilah hampir dengan nilai sebenar yang ditetapkan pada pipet.
- Contohnya: A = 100 x Vpurata/ V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1.0019 = 100.19%
- Paip ini dikalibrasi dengan betul.
Langkah 5. Sekiranya perlu, hantarkan pipet untuk penentukuran
Sekiranya pipet anda tidak lulus ujian penentukuran, jangan gunakannya untuk percubaan sekarang. Pipet adalah peralatan makmal yang sangat rapuh dan mahal. Anda tidak dapat memperbaiki kalibrasi sendiri, pipet harus dihantar untuk diperbaiki. Sebagai alternatif, beberapa syarikat akan datang ke makmal anda dan menentukurkan pipet di lokasi.
