Terdapat banyak cara untuk mengukur pertumbuhan bakteria, dan satu cara lebih rumit daripada yang lain. Walaupun kadang-kadang konsistensi pengukuran harus diabaikan, cara termudah adalah cukup untuk mengukur pertumbuhan bakteria dengan tepat sehingga sering digunakan. Kaedah yang paling biasa digunakan adalah memantau dan mengira bakteria, mengukur jisim kering atau basah, dan mengukur tahap kekeruhan / kekeruhan. Makmal sekolah anda harus mempunyai alat dan peralatan yang diperlukan untuk melakukan sekurang-kurangnya salah satu eksperimen ini.
Langkah
Kaedah 1 dari 3: Memantau Bakteria Secara Langsung
Langkah 1. Sediakan ramuan
Terdapat banyak alat khas yang perlu disediakan dan mungkin tidak tersedia di makmal biologi. Siapkan semua peralatan dan bekas sebelum menjalankan eksperimen supaya tidak ada kerumitan semasa prosesnya. Anda mesti mengetahui setiap ramuan yang digunakan dengan segera, dan syarat asas eksperimen ini.
- Sediakan ruang pembilang. Ia mempunyai ruang terbina dalam, kaca mikroskop dan mikroskop sehingga mudah dipasang dan digunakan. Anda boleh membelinya dari makmal atau kedai bekalan sekolah. Alat ini harus mempunyai arahan yang membimbing anda melalui keseluruhan proses.
- Sediakan cawan penuangan atau cawan penyebaran. Kedua-dua bekas ini membolehkan anda memantau bakteria di dalamnya.
- Budaya adalah istilah yang digunakan untuk menggambarkan pertumbuhan organisma dalam eksperimen.
- Kaldu adalah medium cair di mana kultur tumbuh.
Langkah 2. Gunakan kaedah piring tuang atau piring penyebaran
Anda juga boleh meletakkan bakteria secara langsung di piring untuk dilihat menggunakan mikroskop. Tuangkan kultur di atas piring dan letakkan di bawah mikroskop. Pantau jumlah sel bakteria yang ada.
Langkah 3. Pastikan dos kepekatan betul
Sekiranya terdapat terlalu banyak, bakteria akan menumpuk satu sama lain dan anda mungkin salah mengira. Cairkan budaya dengan mencampurkan lebih banyak kuah. Sekiranya terlalu sedikit, hasil pengiraan tidak akan tepat. Saring kaldu menggunakan sistem penapisan.
Langkah 4. Kira bakteria
Langkah terakhir adalah mengira bakteria satu persatu. Lihat melalui kanta pembesar di ruang pengiraan dan tuliskan bilangan bakteria yang anda lihat. Bandingkan hasilnya dengan keputusan ujian lain.
Kaedah 2 dari 3: Mengukur Jisim Kering dan Basah
Langkah 1. Pastikan anda mempunyai peralatan yang betul
Kaedah ini menggunakan peralatan yang mahal dan banyak masa. Sekiranya makmal anda tidak mempunyai peralatan yang anda perlukan, ada baiknya anda menggunakan kaedah lain. Walau bagaimanapun, jika makmal anda dilengkapi dengan cukup baik, kami mengesyorkan kaedah ini kerana ia memberikan hasil yang lebih konsisten. Dalam kaedah ini, anda memerlukan:
- Ketuhar perolakan graviti hidraulik
- Bekas penimbang yang diperbuat daripada aluminium
- Satu set termos (botol makmal)
- Mesin sentrifugal (centrifuge) atau sistem penapisan makmal
Langkah 2. Pastikan budaya berada dalam termos
Tambahkan kultur ke labu. Pada tahap ini, budaya harus menjadi kuah, walaupun kemudian akan dipisahkan lagi.
Langkah 3. Keringkan bekas penimbang aluminium di dalam ketuhar makmal
Sebagai gantinya, anda boleh menggunakan membran penapis selulosa asetat dengan diameter 47 mm dan ukuran pori 0.45µm. Apa sahaja wadah penimbang yang anda gunakan, timbangkannya kerana perlu ditolak kemudian ketika menimbang sel bakteria.
Langkah 4. Kacau kultur ke dalam labu sehingga sebati
Sel akan tenggelam secara semula jadi kerana graviti dan perlu dikacau agar tersebar sekata di dalam termos. Dengan cara itu, anda dapat lebih banyak sampel.
Langkah 5. Gunakan empar untuk memisahkan sel bakteria dari kaldu
Alat ini memutar termos dan menyeimbangkan dengan cepat sehingga mengalirkan kaldu dan meninggalkan kultur di dalam termos.
Langkah 6. Gosokkan pes pada labu dan masukkan ke dalam bekas penimbang
Buangkan kuahnya kerana anda tidak memerlukannya lagi. Namun, jangan menyingkirkan labu kerana masih akan digunakan.
Langkah 7. Bilas mesin empar dan tuangkan air bilas ke dalam bekas
Jatuhkan air bilas dalam termos ke sel bakteria untuk mendapatkan berat basah.
Langkah 8. Cari berat kering
Untuk mengukur berat kering, letakkan bekas di dalam ketuhar dan keringkan pada suhu 100ºC selama 6-24 jam mengikut arahan dari ketuhar dan / atau bekas penimbang yang digunakan. Pastikan suhu tidak terlalu tinggi sehingga bakteria tidak terbakar. Timbang bakteria apabila selesai, dan jangan lupa mengurangkan hasilnya dengan berat bekas penimbang.
Kaedah 3 dari 3: Mengukur Kekeruhan
Langkah 1. Sediakan peralatan yang diperlukan
Anda memerlukan sumber cahaya dan spektrofotometer. Kedua-duanya boleh didapati di kedai bekalan makmal. Spektrofotometer harus mempunyai arahan yang akan membimbing anda dalam menggunakan instrumen mengikut model yang anda miliki. Harga spektrofotometer cukup berpatutan dan mudah digunakan sehingga boleh menjadi salah satu kaedah yang paling biasa digunakan untuk mengukur pertumbuhan bakteria.
Langkah 2. Nyalakan sampel
Menurut istilah Layman, kekeruhan adalah tahap kekeruhan suatu sampel. Anda perlu mendapatkan nombor pengukuran kekeruhan, yang diukur dalam NTU (Unit Kekeruhan Nefelometrik). Alat ini perlu dikalibrasi sebelum dapat mengukur sampel dengan tepat.
Langkah 3. Catat hasilnya
Kekeruhan dipengaruhi oleh bilangan bakteria dalam sampel. Spektrofotometer juga akan memberitahu anda peratusan penghantaran (% T). Angka ini akan meningkat sekiranya kekeruhan menurun. Bandingkan hasilnya dengan hasil ujian lain untuk mengukur pertumbuhan bakteria.
Amaran
- Oleh kerana anda berhadapan dengan koloni bakteria, berhati-hati dengan memakai peralatan keselamatan seperti cermin mata dan sarung tangan. Sebaiknya memakai topeng, lebih baik jika anda tidak mengetahui jenis bakteria yang sedang dikaji.
- Berhati-hati sebelum menangani sebarang jenis bakteria, walaupun jenis yang tidak berbahaya. Pastikan semua luka terbuka di badan anda ditutup sepenuhnya sebelum memulakan.
