Cara Melakukan Pencairan Rantai: 9 Langkah (dengan Gambar)

2024 Pengarang: Jason Gerald | [email protected]. Diubah suai terakhir: 2023-12-16 11:29

Dalam kimia, pencairan adalah proses mengurangkan kepekatan bahan dalam larutan. Pencairan rantai adalah pencairan berulang larutan untuk meningkatkan faktor pencairan dengan cepat. Prosedur ini biasanya dilakukan dalam eksperimen yang memerlukan penyelesaian yang sangat cair dengan ketepatan yang tinggi. Contohnya eksperimen yang melibatkan keluk kepekatan pada skala logaritmik atau eksperimen untuk menentukan ketumpatan bakteria. Pengenceran rantai digunakan secara meluas dalam eksperimen saintifik seperti biokimia, mikrobiologi, farmakologi, dan fizik.

Langkah

Kaedah 1 dari 2: Melakukan Pencairan Asas

Langkah 1. Tentukan larutan pelarut yang sesuai

Sangat penting untuk menentukan cecair yang akan digunakan untuk pencairan. Banyak larutan larut dalam air suling, tetapi ini tidak selalu berlaku. Sekiranya anda mencairkan bakteria atau sel lain, lakukan pada media kultur. Cecair yang anda pilih akan digunakan untuk semua pencairan rantai.

Sekiranya anda ragu-ragu mengenai pencairan mana yang harus digunakan, dapatkan bantuan atau cari dalam talian. Carilah contoh dari orang lain yang telah melakukan pencairan rantai yang serupa

Langkah 2. Sediakan sebilangan tabung uji yang mengandungi 9 mL pelarut

Tabung uji digunakan untuk pencairan kosong. Pertama, masukkan sampel yang tidak dicairkan ke dalam tiub pertama, kemudian lakukan pencairan berturut-turut ke tabung seterusnya.

• Labelkan semua tabung yang digunakan sebelum memulakan pencairan supaya anda tidak keliru setelah eksperimen dijalankan.
• Setiap tiub akan diisi dengan 10 pencairan, bermula dari tiub yang zatnya belum dicairkan. Pencairan pada tiub pertama adalah 1:10, diikuti oleh 1: 100 pada tiub kedua, 1: 1000 untuk tabung ketiga, dan seterusnya. Tentukan jumlah pencairan yang mesti dilakukan terlebih dahulu, supaya anda tidak membuang larutan pengencer.

Langkah 3. Sediakan tabung uji yang mengandungi sekurang-kurangnya 2 mL larutan tidak dicairkan

Jumlah minimum larutan yang akan dicairkan yang diperlukan untuk melakukan pencairan rantai ini ialah 1 mL. Sekiranya anda menggunakan hanya 1 mL, tidak akan ada penyelesaian yang tidak dicairkan. Label BLM untuk penyelesaian yang tidak dicairkan.

Campurkan larutan dengan teliti sebelum memulakan pencairan

Langkah 4. Lakukan pencairan pertama

Ambil 1 mL larutan yang tidak dicairkan dari tabung uji BLM dengan pipet dan masukkan ke dalam tabung uji berlabel 1:10 yang mengandungi 9 mL pelarut, kemudian gaul hingga sebati. Kini terdapat 1 mL larutan yang tidak dicairkan dalam 9 mL pelarut. Oleh itu, larutan tersebut telah dicairkan oleh faktor pencairan 10.

Langkah 5. Lakukan pencairan kedua

Untuk pencairan kedua, ambil 1 mL larutan dari tiub 1:10, kemudian masukkan ke dalam tiub 1: 100 yang juga mengandungi 9 mL pelarut. Pastikan larutan dalam tiub 1:10 dicampurkan sepenuhnya sebelum menambahkannya ke tiub seterusnya. Sekali lagi, pastikan pencairan dalam tiub 1: 100 dicampur sepenuhnya. Penyelesaian dari tiub 1:10 dicairkan 10 kali ganda dalam tiub 1: 100.

Langkah 6. Teruskan prosedur ini untuk melakukan pencairan rantai yang lebih lama

Proses ini dapat diulang sebanyak yang diperlukan untuk mendapatkan kepekatan larutan yang diinginkan. Dalam eksperimen menggunakan keluk kepekatan, anda boleh melakukan pencairan rantai untuk menghasilkan sejumlah penyelesaian dengan pencairan 1, 1:10, 1: 100, 1: 1,000.

Kaedah 2 dari 2: Mengira Faktor Pencairan dan Kepekatan Akhir

Langkah 1. Hitung nisbah pencairan terakhir dalam pencairan rantai

Nisbah pencairan total dapat ditentukan dengan mengalikan faktor pencairan dari setiap langkah hingga langkah terakhir. Ilustrasi matematik adalah dengan formula D_t = D₁ x D₂ x D₃ x… x D , D_t adalah faktor pencairan total dan D adalah nisbah pengencer.

• Sebagai contoh, katakan anda melakukan pencairan 1:10 4 kali. Pasangkan faktor pencair ke dalam formula: D_t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10,000
• Faktor pengencer pada tiub keempat dalam pencairan rantai ini ialah 1: 10,000. Kepekatan bahan selepas pencairan 10.000 kali lebih rendah daripada sebelumnya dicairkan.

Langkah 2. Tentukan kepekatan larutan selepas pencairan

Untuk menentukan kepekatan akhir larutan selepas pencairan rantai, anda mesti mengetahui kepekatan awalnya. Formulanya ialah C_akhir = C_permulaan/ D, C_akhir ialah kepekatan akhir larutan yang dicairkan, C_permulaan adalah kepekatan awal larutan asal, dan D adalah nisbah pencairan yang telah ditentukan.

• Contohnya: Sekiranya anda memulakan dengan larutan sel yang kepekatannya adalah 1,000,000 sel per mL dan nisbah pencairan adalah 1,000, berapakah kepekatan akhir sampel yang dicairkan?

• Dengan menggunakan formula:

  • C_akhir = C_permulaan/ D
  • C_akhir = 1.000.000/1.000
  • C_akhir = 1000 sel per mL.

Langkah 3. Pastikan semua unit adalah sama

Semasa melakukan sebarang pengiraan, pastikan bahawa unit selalu sama pada akhir pengiraan. Sekiranya unit awal adalah sel per mL, pastikan unit tetap sama pada akhir pengiraan. Sekiranya kepekatan awal adalah bahagian per juta (bpd), maka kepekatan akhir juga mestilah dalam unit bpj.